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《华南热带农业大学》 2007年
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板蓝根根腐病病原鉴定及拮抗微生物的筛选

王树桐  
【摘要】: 近年来,板蓝根根腐病在一些产区发生逐年加重,成为板蓝根生产的限制性障碍。本文以板蓝根根腐病为研究对象,进行了病原菌的分离、致病性测定、种类鉴定、生物学特性研究以及拮抗微生物的筛选试验。 分别于2005年7月和2006年7月,从河北省唐山地区采集板蓝根根腐病样品108份,共分离获得172株分离物,经形态学鉴定属于2属3个种:茄腐镰刀菌(Fusarium solani)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和禾谷丝核菌(Rhizoctonia cereadis)。茄腐镰刀菌分离频率最高(48.8%),其次为尖孢镰刀菌(44.2%),禾谷丝核菌分离频率最低(7%)。从每种菌中选取代表菌株,分别是:茄腐镰刀菌菌株P4和P5,尖孢镰刀菌菌株P1和禾谷丝核菌菌株P2。经致病性测试,结果表明:菌株P4、P5致病性最强,发病率均为100%,病情指数在55以上;P1致病性较弱,发病率为89%,病情指数为36;P2的致病性最弱,发病率为67%,病情指数为31。 利用ITS序列分析从分子水平对菌株P1、P2、P4和P5进行了种类鉴定。结果表明:菌株P1与GenBank中尖孢镰刀菌(DQ459007)的同源性为100%,P2与禾谷丝核菌(AJ242887)同源性为100%,P4与茄腐镰刀菌(AY310442)的同源性为99%,P5与茄腐镰刀菌(AJ608989)的同源性为100%。这证明了形态学鉴定的结果是正确的,也进一步说明了ITS序列对于真菌种间鉴定是可行的。在研究中还发现利用ITS序列分析病菌种内或种以下水平没有发现差异或差异不明显,因此ITS序列分析不能作为种内或种以下水平鉴定和分类的依据。 通过对P1、P2、P4和P5四个菌株在不同温度、pH值、碳源、氮源、相对湿度条件下菌丝生长、产孢量、孢子萌发以及致死温度的研究。结果表明:菌株P1在PDA培养基上菌丝生长、产孢量和孢子萌发最适温度均为25℃,菌丝生长和分生孢子萌发最适pH值均为6,产孢量最适pH值为5,最适碳源为蔗糖,最适氮源为硝酸钠,在相对湿度低于90%孢子不萌发,分生孢子致死温度为55℃。菌株P2在PDA培养基上最适生长温度为30℃,在pH值为6时菌丝生长速度最快:最适碳源为淀粉,最适氮源为硝酸钠。菌株P4和P5在PDA培养基上培养,菌丝生长和产孢量最适温度均为30℃,孢子萌发最适温度为25℃,菌丝生长、产孢量和分生孢子萌发最适pH值均为7,最适碳源为乳糖,最适氮源为硝酸钠,在相对湿度低于90%时孢子不萌发,分生孢子致死温度为50℃。 本研究以板蓝根根腐病菌(P4菌株)为靶标菌,共筛选得到了73株拮抗放线菌和38株拮抗细菌。其中,菌株B4228和A4075对靶标病原菌的抑制作用较强。对B4228和A4075两个菌株进行抑菌谱测定的结果表明,两个菌株对番茄早疫病菌(Alternaria solani (Ellis et Martin) Jones et Grout.)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、棉花枯萎病菌(Veticillium dahliae)、棉花立枯病菌(Rhizoctonia solani Kühn)、黄瓜炭疽病菌(Colletotrichum lagenarium)、板蓝根根腐病菌菌株P2(Rhizoctonia cereadis)均有较好的抑制效果。经种类鉴定,拮抗菌株B4228为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis B4228)
【学位授予单位】:华南热带农业大学
【学位级别】:博士后
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S435.672

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【参考文献】
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