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《厦门大学》 2017年
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内源性大麻素在翡翠贻贝(Perna viridis)附着中的作用

盛彦青  
【摘要】:大麻素是一类能够通过作用于大麻素受体,调节神经递质释放,从而调节神经、免疫等功能的化合物。人体内合成和分泌的一些小分子化合物也能作用于大麻素受体,被称为内源性大麻素。在无脊椎动物中内源性大麻素已有发现。目前,已在紫贻贝中(Mytilus edulis)、淡水水螅(Hydra vulgaris)等中提取到N-花生四烯酰乙醇胺(ananadamide,AEA)、2-花生四烯酰甘油酯(2-arachidonoylgly erol,2-AG)等内源性大麻素(Sepe et al.,1998)。并且,在斑马贻贝(Dreissena polymorpha)中的研究表明,AEA及其类似物能够抑制斑马贻贝的附着,并且这个作用是可逆的,说明内源性大麻素很可能参与斑马贻贝附着的调控(Angarano et al.,2009)。翡翠贻贝(Perna viridis)作为我国沿海一种主要的污损贝类,关于其附着的相关机制,研究相对较少。本文,根据以上研究结果,初步探讨了内源性大麻素在翡翠贻贝附着中的作用。得到的主要结果如下:(1)AEA、2-AG、AA对翡翠贻贝的附着均有一定的抑制作用。它们可能参与了翡翠贻贝附着的调控。大麻素受体激动剂AM1241、HU308以及MAGL降解酶JZL184对翡翠贻贝的附着也有一定的抑制作用。说明AEA、2-AG可能是通过翡翠贻贝大麻素受体对其附着进行调控的。CB1受体拮抗剂SR141716A与AM251对AEA在翡翠贻贝附着中的作用并没有明显的竞争性抑制作用,CB2受体拮抗剂SR144528对2-AG在翡翠贻贝附着中的作用也没有明显的抑制作用。说明翡翠贻贝中虽然很可能存在大麻素受体,但是与脊椎动物中的大麻素受体不完全相同。AEA和2-AG对翡翠贻贝附着蛋白表达的影响实验结果表明,AEA可能是通过影响了 FP1V-1的表达,从而抑制了翡翠贻贝的附着。2-AG可能是通过影响了 FP1V-1、FP1V-2、FP2、FP4V-1和FP4V-2的表达从而抑制了翡翠贻贝的附着。(2)LC-MS/MS结果表明,翡翠贻贝中确实存在AEA、2-AG、OEA、PEA四种内源性大麻素。附着和不附着翡翠贻贝内源性大麻素含量对比,结果表明不附着翡翠贻贝中2-AG的含量较高,说明2-AG可能参与了翡翠贻贝不附着的调控。(3)转录组Unigene的注释中,在Nr数据库中注释到一个CB1类受体。证明翡翠贻贝中确实存在大麻素受体。附着和不附着翡翠贻贝转录组结果表明,在不附着组中2-AG的含量比CON组确实要高。对转录组进行差异表达分析,结果表明。一方面2-AG可能作用于突触前膜上的TRP离子通道,使细胞内Ca2+浓度降低,引起DSE现象,导致NO合成受阻,从而抑制翡翠贻贝的附着。另一方面2-AG可能作用于线粒体膜上的CB受体,影响细胞内能量的代谢,从而抑制翡翠贻贝的附着。
【学位授予单位】:厦门大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S917.4

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